返回首页 客户留言 联系我们
产品搜索/ Product search
公司名称:北京吉泰远成科技有限公司
电话:
手机: 13912363467
联系人: 陈瑞
传真:010-89942122
E-mail: 2501981898@qq.com
技术文章                     当前位置:首页 < 技术文章 < 技术资讯
AlphaLISA表观遗传学试剂选购
点击次数:2074 更新时间:2020-12-17

AlphaLISA表观遗传学试剂是由Alpha技术所延伸出来的便利产品,可适用于侦测PeptideFull-length型式的Histone蛋白。具有高度专一性,可藉由侦测各种后转译修饰类型的Histone蛋白,定量组蛋白密码(histone code)调控者(例如Acetyltransferase, Methyltransferase, Deacetylase, Demethylase)的酵素活性。与ELISA产品相比,AlphaLISA侦测试剂具有更加宽广的侦测区间,可减少样品稀释比例的测试步骤;并且具有更精简快速的实验流程,让研究者能够更快取得定量结果。

AlphaLISA表观遗传学试剂作用原理:

AlphaLISA 侦测技术是由两种核心物质所组成,一为Donor bead,另一为Acceptor beadDonor bead 本身身带有光敏感物质"Phthalocyanine",因此当以680 nm 雷射光激发Donor bead 时,此光敏感物质可催化周遭的氧分子形成活化态,并于作用范围内激发邻近的Acceptor bead 产生化学冷光反应,此冷光能量会进一步转移至Acceptor bead 本身所带有的萤光物质,使其终产生615 nm 萤光讯号。与其他侦测平台相比(例如FRETTR-FRET)AlphaLISA 技术的能量转移有效距离长达200 nm,因此不论是胜肽、重组蛋白、或是细胞内原始含有的蛋白质,皆可作为实验侦测对象。具有专一性佳、灵敏度高、侦测区间广泛以及流程简单等多项优质特点。

在进行实验时,研究者仅需自行准备(1). 待测酵素与辅因子(cofactor)(2). 键结有Biotin Histone peptide substrate (Histone 全长蛋白),即可开始进行实验。此两项所需试剂在产品应用文件中皆有详尽的建议资讯,因此研究者可安心参照选购。

AlphaLISA anti-histone H3 K9me2 antibody Acceptor beads的专一性测试结果证实此试剂的确能够专一性地辨识侦测H3K9me2 biotinylated peptide,并且无论是H3K9me1 peptidesH3K9me3 peptidesmethylated H3K4 peptidesunmodified H3 peptides,皆无法干扰反应产生伪阳性结果。

所有Alpha系列的Histone modification侦测试剂,皆实际使用特定酵素进行完整测试,具有详尽的测试条件与实验流程可供参照。使用G9a Histone H3-Lysine N-methyltransferase所进行的酵素用量和时间反应测试结果,受测产品为Anti-methyl-Histone H3 Lysine 9 (H3K9me2) AlphaLISA® Acceptor Beads (需同时搭配Alpha Streptavidin Donor beads等产品使用)。其他测试项目包含:Cofactor titration (ex, SAM)Enzyme inhibitionZ'-factor determination.

Methyl ModificationsAcetyl Modifications
Mark DetectedAlphaLISA anti-mark Acceptor BeadsMark DetectedAlphaLISA anti-mark Acceptor Beads
Assay PointsCat. No.Assay PointsCat. No.
H3K4 Unmodified500AL119CH3K4 Unmodified500AL119C
10,000AL119M10,000AL119M
50,000AL119R50,000AL119R
H3K4me1-2500AL116CH3K9ac500AL114C
10,000AL116M10,000AL114M
50,000AL116R50,000AL114R
H3K9me2500AL117CH3K27ac500AL120C
10,000AL117M10,000AL120M
50,000AL117R50,000AL120R
H3K27me2-1500AL121Cp53 K382ac500AL124C
10,000AL121M10,000AL124M
50,000AL121R50,000AL124R
H3K27me3500AL122C备注:(1). 每个Assay Point 是指使用384-well 多孔盘,每个well 内含有25 µl 反应体积为计算。(2). AlphaLISA 系列产品皆属于侦测试剂,并无提供enzyme 与substrate,若为原厂测试过品项,可提供您相关材料来源作为参考。
10,000AL122M
50,000AL122R
H3K36me2500AL123C
10,000AL123M
50,000AL123R
Additional Items Required for AlphaLISA histone modification assays
ProductAssay PointsCat. No.
AlphaScreen Streptavidin Donor beads2,0006760002S
10,0006760002
100,0006760002B
AlphaLISA biotin-anti-histone H3 (C-ter) antibody500AL118C
(required for full-length Histone substrates)10,000AL118M
 50,000AL118R
AlphaLISA 5X Epigenetics Buffer 1 kit10 mlAL008C
(required for Histone H3-derived peptidic substrates)100 mlAL008F

化工仪器网

推荐收藏该企业网站